Methodenbeschreibung Nitrit
GERÄTE:
Eppendorfpipetten (10-100 µl, 100-1000 µl und 1-5 ml)
div. Meßkolben : zum Ansetzen von Standards
div. Meßzylinder und Bechergläser zum Ansetzen der Reagenzien
div. Flaschen zur Aufbewahrung der Reagenzien
Photometer
REAGENZIEN:
Sulfanilamid: Löse 1,0 g Sulfanilamid in 10 ml konz. HCl und 60 ml Aqua bidest. Nach dem Abkühlen auf 100 ml auffüllen. In einer braunen Glasflasche aufbewahren. Für mehrere Wochen haltbar.
NED: 100 mg N-(1-naphtyl)-ethylendiamin-dihydrochlorid (NED) in 100 ml Aqua bidest lösen und gekühlt in einer Glasflasche aufbewahren. Haltbar bis Braunfärbung auftritt.
NO2-Standard: MERCK (1 g NO2 pro Liter (=21,734 mmol/l)
Salzwasser: 36g NaCl pro Liter
STANDARDS
Stammlösung: NO2-Standard (MERCK) = 21,734 mmol/l
Arbeitsstandards: Aus der obigen Stammlösung verschiedene Arbeitsstandards durch Verdünnen mit Salzwasser herstellen (5-6 Eichpunkte). Eichbereich: 1,087 - 5,435 µmol/l
DURCHFÜHRUNG:
5ml Probe oder Standard mit 100 µl Sulfanilamid und 100 µl NED versetzen. Nach 30 Min. die Absorption bei 540 nm messen.
AUSWERTUNG:
Durch die Messung der Absorption der Arbeitsstandards eine Eichkurve erstellen und aufgrund der Absorption der Proben die Konzentrationen in den Proben bestimmen.
MÖGLICHE STÖRUNGEN:
Hohe Konzentrationen an H2S (> 1mmol/l) im Probenmaterial behindern die Messungen. Daher sollten solche Proben vor der Messung mit 10 µl HCl (30 %/suprapur) pro ml Probe angesäuert werden und für 1-2 Tage ohne Deckel in einem kühlen Raum aufbewahrt werden
(Verdünnungsfaktor bei der Auswertung berücksichtigen!)
Das Nitrit wird bakteriell sehr schnell umgesetzt, daher sollte die Proben unmittelbar nach der Probennahme gemessen und vor Verunreinigungen geschützt werden.