Methodenbeschreibung Phosphat
GERÄTE:
Eppendorfpipetten (10-100 µl , 100-1000 µl und 1-5 ml)
div. Meßkolben zum Ansetzen von Standards
div. Meßzylinder und Bechergläser zum Ansetzen der Reagenzien
div. Flaschen zur Aufbewahrung der Reagenzien
Photometer
REAGENZIEN:
H2SO4 (4,5 m): 750 ml Aqua bidest und 250 ml konz. H2SO4 mischen. Abkühlen lassen und in PE-Flasche aufbewahren. Haltbar.
Ascorbinsäure: 10 g Ascorbinsäure in 50 ml Aqua bidest. lösen und 50 ml H2SO4 (4,5 M ) zufügen. In PE-Flasche im Kühlschrank aufbewahren. Wöchentlich ersetzen.
Tartratlösung: 2,5 g Kalium-Antimon-Oxid-Tartrat in 100 ml Aqua bidest. lösen. In PE-Flasche, gekühlt aufbewahren. Haltbar.
Heptamolybdatlösung: 4 g Ammoniumheptamolybdat-Tetrahydrat in 30 ml Aqua bidest. lösen und vorsichtig zu 90 ml
der 4,5 M H2SO4 geben. 5 ml Tartratlsg. hinzufügen. Für mehrere Monate haltbar bei gekühlter Lagerung in PE-Flasche.
PO43--Standard (MERCK Titrisol ) 1 g PO43- pro Liter
Salzwasser 36 g NaCl pro Liter Aqua bidest.
STANDARDS
Stammlösung: PO43--Standard (MERCK Titrisol ) mit Aqua bidest. auf exakt 1 l auffüllen. (= 10,52 mmol/l). In PE-Flasche, gekühlt, mehrere Monate haltbar.
Arbeitsstandards: Aus der obigen Stammlösung verschiedene Arbeitsstandards durch Verdünnen mit Salzwasser herstellen (5-6 Eichpunkte).
Eichbereich: 2,63 - 26,3 µmol/l (für Porenwasserproben) bzw. 0,526 - 5,260 µmol/l (für Proben aus der Wassersäule).
DURCHFÜHRUNG:
2000 µl Porenwasser oder Standard werden mit 3000 µl Aqua bidest., 100 µl Ascorbinsäure und 100 µl Heptamolybdatlsg. versetzt . Seewasser wird zur Phosphatbestimmung unverdünnt (5ml) eingesetzt. Die Absorption kann nach 10 Min. bei einer Wellenlänge von 880 nm gemessen werden.
AUSWERTUNG:
Durch die Messung der Absorption der Arbeitsstandards eine Eichkurve erstellen und aufgrund der Absorption der Proben die Konzentrationen in den Proben bestimmen.
MÖGLICHE STÖRUNGEN:
Hohe Konzentrationen an H2S (> 1mmol/l) im Probenmaterial behindern die Messungen. Daher sollten solche Proben vor der Messung mit 10 µl HCl (30%/suprapur) pro ml Probe angesäuert werden und für 1-2 Tage ohne Deckel in einem kühlen Raum aufbewahrt werden
(Verdünnungsfaktor bei der Auswertung berücksichtigen!)